Падрабязнае тлумачэнне выліцця рэагентаў у эксперыментах з ПЦР

Падрабязнае тлумачэнне выліцця рэагентаў у эксперыментах з ПЦР.

У эксперыменце з ПЦР, пасля дадання сістэмы рэакцыі, мы ўважліва пакрываем вечкам і неаднаразова пацвярджаем, што вечка зачынена, каб пазбегнуць выліцця рэагентаў. Але часам у нас таксама ёсць сумневы: мы пацвердзілі, што вечка шчыльна зачыненая, але пасля завяршэння эксперыменту рэагент усё яшчэ выпарыцца. у чым прычына?

На самай справе, выманне рэагентаў з'яўляецца адной з найбольш распаўсюджаных праблем у эксперыментах з ПЦР, і ёсць шмат фактараў, якія ўплываюць на вылажэнне рэагентаў.

Выпарэнне ставіцца да таго, што падчас эксперыменту з ПЦР, раствора рэакцыі выпараецца пры высокай тэмпературы, а затым кандэнсуецца на сценцы бутэле у змене канцэнтрацыі рэакцыйнага раствора. Змены, колькасць рэакцыйнага раствора знізілася, а некаторыя нават выпарыліся да сухасці, што прывяло да несапраўдных эксперыментаў.

1. Ціск гарачага вечка, тэмпература

У эксперыментах з ПЦР мы звычайна награваем вечка, каб прадухіліць кандэнсацыю пары рэагентаў. Тэмпература нагрэванай крышкі звычайна вышэй, чым у рэакцыйнага раствора, каб прадухіліць кандэнсацыю пароў.

Цеплавыя вечкі нагрэву цыклера могуць быць прыблізна падзелены на наступныя чатыры тыпы: нерэгуляваныя награвальныя вечкі, рэгуляваныя награвальныя вечкі, адаптыўныя награвальныя вечкі і аўтаматычныя награвальныя вечкі. Рэгуляваная нагрэтая вечка мае сціск для пальцаў. Калі не шчыльна зацягнуцца, рэагенты будуць выпарацца. Выпарэнне краёў можа быць зведзена да мінімуму за кошт павелічэння ціску на нагрэты вечка. Часам пераглынанне можа заціснуць трубку і скруціць ручку. У звычайных абставінах электрычны разумнае ацяпляльнае нацяпленне можа аўтаматычна выяўляць расходныя матэрыялы розных вышынь, аўтаматычна сціскаюць расходныя матэрыялы, а ціск з'яўляецца аднастайным і пастаянным, тым самым памяншаючы выпарэнне рэагентаў і ручныя памылкі, а таксама павышэнне эксперыментальнай дакладнасці і паўтаральнасці.

2. Дэфармацыя расходных матэрыялаў

Для ўцечак парах, большасць людзей думае, што ціску гарачай вечкі недастаткова. Ціск гарачай вечкі вельмі важны, але гэта толькі адзін аспект. На самай справе расходныя матэрыялы таксама вельмі важныя.

Пласціны адтуліны з ПЦР звычайна вырабляюцца з пластыкавых матэрыялаў, якія значна пашыраюцца і дэфармаваны пасля нагрэву. Хуткасць цеплавога пашырэння металічнай асновы ПЦР, якая выкарыстоўваецца для размяшчэння пласціны адтуліны ПЦР, вельмі нізкая, а пласціна адтуліны ПЦР не можа нармальна пашырацца ўздоўж плоскасці пасля цеплавога пашырэння. Стан выпінання робіць верхнюю цеплавую крышку не ў стане цалкам звязацца з паверхняй пласціны адтуліны ПЦР, што прыводзіць да нераўнамернай тэмпературы і ціску, што выклікае выпарэнне рэагентаў на ўскрайку пласціны адтуліны ПЦР і ўплывае на эфект выяўлення ПЦР.

3. Расходныя матэрыялы не шчыльна запячатаны

Сцягласць цеплавой крышкі і расходных матэрыялаў не азначае, што вечка трубы з ПЦР шчыльна зачыненая, а якасць пласціны ПЦР няроўная. Якасныя расходныя матэрыялы, паверхня асадкі і вечка роўныя, а ўшчыльненне за крышкай за полем добра, і яго не проста ўцечку. Састарэлыя расходныя матэрыялы маюць няроўныя носікі і радыяльныя лініі, якія могуць лёгка выклікаць уцечку ці нават высыхаць.

Такім чынам, у эксперыментах з ПЦР паспрабуйце выбраць якасныя і прыдатныя расходныя матэрыялы. У той жа час рэакцыю можна пашырыць, каб звесці да мінімуму ўплыў выпарэння сістэмы на рэакцыю.